捕集離子淌度質譜 （ Trapped Ion Mobility Spectrometry，TIMS ）

離子淌度譜（ Ion mobility spectrometry，IMS ）是一種強大的分析技術，在過去五十年中已得到廣泛應用，主要應用于化學物理和分析化學應用。直到最近才探索了 IMS 與 MS（ IMS-MS ）聯(lián)用的潛力，用于肽段和蛋白質的分離、鑒定和定量。

timsTOF 系列質譜儀

timsTOF 技術

捕集離子淌度譜（ TIMS ）是一種 IMS 技術，離子在氣流的推動下通過 TIMS 通道（ 離子漏斗 ）。除了氣流推動力，離子同時受到電場的反向作用力。在兩種力的作用平衡下，離子可被捕集在離子漏斗中。通過調整電場強度，減弱電場作用力，可選擇性地讓不同淌度性質的離子先后通過離子漏斗，從而達到分離的功能。

 通過將 TIMS 分析器整合到四極桿飛行時間（ QTOF ）質譜儀的前端，離子可在釋放用于 MS 分析之前在一段特定時間內進行累積。多肽離子在 TIMS 中進行淌度分離和釋放（ ~ 100 ms ），然后在檢測器中進行檢測，產(chǎn)生 TIMS 的 MS 熱圖；經(jīng) TIMS 分離的多肽離子進入四極桿中進行隔離并選擇母離子，母離子選擇過程是在離子釋放的過程中同步進行。zui后母離子和碎片離子根據(jù)淌度值進行對齊。

 TIMS
捕集離子淌度譜（ TIMS ）是氣相中的 IMS 分離技術，除了 HPLC 分離和質譜分析，它通過增加分離維度來應對復雜樣品，提高了峰容量和化合物表征的信息。同樣重要的是，TIMS 分析器還用于積累和富集給定質量和淌度值的離子，從而在靈敏度和速度上得到提高，同時增加分離的維度。

特別的前端TIMS分析儀針對更高速度的霰彈蛋白質組學進行了優(yōu)化，能從較小樣品量中獲得突出識別性能。其特別的雙TIMS幾何形狀允許在第1個TIMS部分中并行累積，并且在實時執(zhí)行額外的TIMS分離步驟之后，離子從第二個TIMS部分釋放出來，用于MS / MS碎裂。這致使近乎100分的占空比，使這種平行堆積和連續(xù)碎裂（PASEF）技術在酶促消化的蛋白質混合物的可重復納流LC-MS分析中具有前所未you的性能。

使用雙 TIMS 技術，現(xiàn)在可使高靈敏度、高速的 shotgun 蛋白質組學實現(xiàn)近 100分 的離子利用率。新穎的設計允許離子在前段積累，而后段的離子根據(jù)離子淌度值順序釋放。此過程稱為 PASEF®（ Parallel Accumulation Serial Fragmentation，平行累積連續(xù)碎裂 ）技術。

PASEF®
在速度方面，布魯克專家重新設計了 MS/MS 技術，以滿足 shotgun 蛋白質組學的要求。借助 PASEF® 技術，可以實現(xiàn) > 100 Hz 的測序速度；低豐度的多肽通過多次選擇并碎裂，其 MS/MS 譜圖質量顯著提高。

用于PASEF質譜法的 timsTOF Pro系統(tǒng)，其使用專有的捕獲離子遷移譜（TIMS）技術，實現(xiàn)了出色的單次肽和蛋白質鑒定性能，具有更高速、更高靈敏度和強大的高通量蛋白質組學分析能力。

 PASEF能力代表了性能的改進，因為它提供更高靈敏度和更高速度的霰彈蛋白質組學，而不損失質量分辨率。PASEF消除了這些臨界限制，對于高靈敏度的近百分的占空比，同時保持兩個前體的超高質量分辨率和產(chǎn)物離子。利用雙TIMS技術的這一重要PASEF功能為科學家們提供了深入研究復雜生物學和發(fā)現(xiàn)低水平生物學重要蛋白質的潛力的工具，或臨床蛋白質組學研究中進行縱向研究。

　　布魯克timsTOF Pro質譜也有利于定量蛋白質組學工作流程，因為這種創(chuàng)新的TIMS-powered的四極桿飛行時間質譜儀（QTOF-MS）由MaxQuant/Perseus和PEAKS Studio蛋白質組學分析軟件支持。

　　定量蛋白質組學是蛋白質組學研究的一個關鍵領域，雙TIMS-powered的PASEF提供的固有優(yōu)勢超過門控、串聯(lián)時間和基于FT的MS分析儀局限性。新的timsTOF Pro提供超過四個數(shù)量級的具有低肽負載（100-200ng）的動態(tài)肽，使其適用于小細胞群體的蛋白質組學和生物臨床研究中經(jīng)常遇到的低樣本量。