利馬前列素，是前列腺素E1的類似物，其主要藥理作用是擴(kuò)張末梢血管，達(dá)到增加血流量以及抑制血小板凝集的目的，對于改善各種局部缺血癥狀，如閉塞性血栓血管炎（TAO）伴發(fā)的潰瘍、疼痛以及發(fā)冷等虛血性癥狀，以及后天性腰椎管狹窄癥伴有的自覺癥狀（下肢疼痛、麻木）和行走能力有十分確切療效，是很有應(yīng)用前景的藥物。

目前關(guān)于列馬前列素的人體藥代動力學(xué)數(shù)據(jù)非常有限，因此建立合適的人體血漿中列馬前列素的檢測方法用于評價(jià)其藥代動力學(xué)行為十分必要，但其超低給藥量（15-30ug/Day)以及極低的血漿達(dá)峰濃度（Cmax約為~1pg/mL）對檢測方法的靈敏度提出了極高要求。三重四極桿質(zhì)譜儀的MRM掃描模式憑借其高靈敏度、高選擇性、高特異性一直以來被視為藥代動力學(xué)評價(jià)的首選檢測手段，LC-MS/MS方法也被作為常規(guī)定量的黃金標(biāo)準(zhǔn)。

列馬前列素本身為PGE1類似物，而人血漿中含有內(nèi)源性的PGE1及其他多種結(jié)構(gòu)類似物甚至同分異構(gòu)體，這些內(nèi)源性干擾成分是其人體藥代動力學(xué)研究的又一大障礙。由于內(nèi)源性干擾成分與列馬前列素理化性質(zhì)、結(jié)構(gòu)非常相近，單純依靠樣品前處理和簡單的色譜分離已經(jīng)被證明無法有效消除或分離內(nèi)源性干擾。目前為止，多次固相萃?。?/span>SPE）和2D-LC-MS/MS系統(tǒng)是減少或分離內(nèi)源性干擾的主要解決方案。但2D-LC監(jiān)測方法每個樣品需要利馬前列素的人體血漿藥動學(xué)研究至少需要監(jiān)測方法的LLOQ達(dá)到0.3~0.5pg/mL。按照文獻(xiàn)建立的前處理方案相當(dāng)長的分析時(shí)間（>50min），通量較低，且2D-LC保留時(shí)間的重現(xiàn)性也是眾所周知的問題。另外，2D-LC方法在不同實(shí)驗(yàn)室間的重現(xiàn)、建立及優(yōu)化都需要花費(fèi)較長時(shí)間，限制了2D-LC方法在藥代動力學(xué)中的廣泛應(yīng)用。

通過建立基于新一代離子淌度差分技術(shù)SelexION+和超高靈敏度QTRAP 6500+質(zhì)譜儀測定人血漿中利馬前列素的檢測方法。該方法僅使用簡單的LC分離，避免了2D-LC系統(tǒng)平臺的復(fù)雜、繁瑣及通量低等缺點(diǎn)，單樣本分析時(shí)間僅為15min，具有良好的靈敏度及重現(xiàn)性，效率較2D-LC系統(tǒng)提高3倍以上。

試驗(yàn)結(jié)果：利馬前列素的人體血漿藥動學(xué)研究至少需要檢測方法的LLOQ達(dá)到0.3~0.5pg/ml。按照文獻(xiàn)建立的前處理方案對血漿樣本進(jìn)行三次SPE處理后，僅使用常規(guī)1D-LC-MS/MS系統(tǒng)，高背景噪音（>104cps）以及大量的內(nèi)源性干擾使得方法難以滿足檢測要求。離子淌度差分技術(shù)SelexION在1D-LC基礎(chǔ)上提供了多一維的分離，在母離子進(jìn)入Q1前，根據(jù)待測物離子的化學(xué)結(jié)構(gòu)性質(zhì)不同，通過特定的補(bǔ)償電壓COV進(jìn)行分離，能夠有效地降低或去除背景噪音、分離同分異構(gòu)體，提供較常規(guī)方法更優(yōu)異的選擇性和特異性。

SelexION+技術(shù)是新一代離子淌度差分技術(shù)，與SelexION+相比，離子傳輸效率提升2倍以上。具有比SelexION+更高的靈敏度?；?/span>SelexION+技術(shù)的MRM檢測模式能與超高效液相色譜兼容，即使峰寬<0.1  min的色譜峰，同時(shí)檢測12個MRM離子對，也能滿足10個數(shù)據(jù)點(diǎn)以上，保證重現(xiàn)性和靈敏度。

憑借SelexION技術(shù)優(yōu)異的選擇性和QTRAP 6500+超高MRM靈敏度，僅用1D-LC分離，人血漿中利馬前列素的LLOQ可達(dá)0.3pg/ml（以血漿濃度計(jì)），并獲得良好的線性和準(zhǔn)確度，完全滿足利馬前列素人體血漿藥代動力學(xué)研究的需要。無需復(fù)雜的2D-LC 系統(tǒng)，彌補(bǔ)了2D-LC 分析時(shí)間長，通量低的缺陷，分析效率較2D-LC 系統(tǒng)提高3 倍以上（15 min vs. 50 min），且具有良好的色譜重現(xiàn)性。整個分析流程較2D-LC 大大簡化，適于在不同實(shí)驗(yàn)室間進(jìn)行方法轉(zhuǎn)移、重現(xiàn)。